微小RNA (miRNA) 是一种小型非编码RNA，在基因的转录后调控中发挥重要作用。miRNA会影响癌症、心脏病、神经退行性疾病等多种生理过程和疾病。miRNA虽然存在于细胞内，但已知它也会被包装进外泌体和微囊泡 (microvesicles) 等细胞外囊泡 (EV) 中，从而也存在于细胞外空间。
miRNA被分选（筛选）进细胞外囊泡是一个主动过程，其机制尚未被完全阐明。然而，目前已提出若干机制来解释miRNA是如何被分选进EV的。
依赖序列基序的分选：
研究表明，miRNA中存在特定的序列基序可诱导其被包装进EV。例如，miRNA中存在的’EXOmotifs’或’GGAG’基序与其被筛选进外泌体有关。
依赖miRNA诱导沉默复合物（miRISC）的分选：
与诱导基因沉默的miRISC相关的miRNA可能会被选择性地分选进EV。作为该复合物组成部分之一的AGO2蛋白可在EV内被发现。
miRNA诱导沉默复合物（miRISC）是miRNA发挥其基因调控功能所依赖的细胞内机制。该复合物中包含与miRNA结合并将其引导至靶mRNA的Argonaute (AGO) 等蛋白质。
关于与miRISC相关的miRNA被选择性分选进EV的机制，目前仍有许多尚未阐明之处。然而，有研究提示，包括外泌体在内的EV中存在AGO蛋白等miRISC的组成成分。这意味着，与这些蛋白质结合的miRNA有可能被共同封入EV中。
这种现象究竟是如何发生的，其确切的分子细节仍在研究之中。miRISC的组成蛋白AGO2存在于EV内，可能在其中发挥着作用。此外，也有一些证据提示miRISC与miRNA的结合会影响它们在细胞与细胞外环境之间的分布，但这一点还需要进一步确认。
Gibbings, D. J., Ciaudo, C., Erhardt, M., & Voinnet, O. (2009). Multivesicular bodies associate with components of miRNA effector complexes and modulate miRNA activity. Nature cell biology, 11(9), 1143-1149.
请注意，由于miRNA与细胞外囊泡 (EV) 生物学领域正在迅速发展，较新的研究有可能就这些机制提供超出我的知识截止时间（September 2021）的更多见解。
依赖HnRNPs的分选：
hnRNPs是表示”异质核糖核蛋白”的英文缩写。其英文全称为“Heterogeneous Nuclear Ribonucleoproteins”。
它们支持一系列RNA加工事件，尤其是剪接（splicing）、RNA转运、mRNA稳定性以及翻译的调控。
hnRNPs通常存在于细胞核中，但也能够移动到细胞质中。其功能主要通过与RNA的相互作用来调节。hnRNPs具有识别并结合特定RNA基序的能力，从而使特定的RNA分子能够被送往特定的细胞内部位。
关于miRNA的分选，一般认为hnRNPs会与miRNA结合，并在将其引导进细胞外囊泡 (EV) 的过程中发挥作用。特别是有研究提示，hnRNPA2B1蛋白会识别miRNA的特定基序，并通过被SUMO化（Sumoylation，一种翻译后修饰）以将它们分选进EV。
然而，hnRNPs与miRNA分选之间的关系尚未被完全阐明，仍需要进一步的研究。
参考文献：Santangelo, L., Giurato, G., Cicchini, C., Montaldo, C., Mancone, C., Tarallo, R., … & Weisz, A. (2016). The RNA-Binding Protein SYNCRIP Is a Component of the Hepatocyte Exosomal Machinery Controlling MicroRNA Sorting. Cell reports, 17(3), 799-808.
依赖Sumoylated-HnRNPA2B1的分选：
被SUMO化（Sumoylation，蛋白质的一种翻译后修饰）的hnRNPA2B1蛋白也可能参与miRNA的分选。被SUMO化的hnRNPA2B1会识别miRNA的特定基序，并将它们分选进EV。
SUMO化（Sumoylation）是一种化学变化，发生于一种名为SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier，小泛素样修饰物）的蛋白质与某种蛋白质结合时，并会影响该蛋白质的各种功能。
具体的变化包括以下几种：
- 蛋白质的激活或失活： 当SUMO与某种蛋白质结合时，可增强或抑制该蛋白质的活性。这适用于酶、转录因子等多种蛋白质。
- 蛋白质的定位： SUMO化可改变蛋白质在细胞内的位置。例如，与SUMO结合的蛋白质可能更容易移动到细胞核。
- 蛋白质间的相互作用： 当SUMO与某种蛋白质结合时，可改变该蛋白质与其他蛋白质相互作用的方式。这是由于蛋白质获得了与新伙伴结合的能力，或者失去了与原有伙伴的结合所致。
- 蛋白质的稳定性： SUMO化会影响蛋白质的稳定性，可延长或缩短其寿命。
通过上述这些影响，SUMO化在调节细胞分裂、DNA修复、转录调控、细胞凋亡（程序性细胞死亡）等细胞过程方面发挥着重要作用。
参考文献：Villarroya-Beltri, C., Gutiérrez-Vázquez, C., Sánchez-Cabo, F., Pérez-Hernández, D., Vázquez, J., Martin-Cofreces, N., … & Falcón-Pérez, J. M. (2013). Sumoylated hnRNPA2B1 controls the sorting of miRNAs into exosomes through binding to specific motifs. Nature communications, 4(1), 1-10.
依赖4E-T的分选：
4E-T（EIF4E transporter）是一种RNA结合蛋白，具有调控RNA转录后代谢与翻译的作用。
EIF4E是“Eukaryotic Translation Initiation Factor 4E”的缩写，是一种具有启动蛋白质翻译（将遗传信息转换为蛋白质的过程）作用的蛋白质。另一方面，4E-T则负责运送该EIF4E，并参与翻译的调节。
具体而言，4E-T与EIF4E结合，并作为其分子伴侣＊发挥功能。由此，EIF4E能够精确地移动到所需的位置，并在适当的时机发挥其作用。
此外，4E-T还发挥着调控mRNA选择性翻译的作用。特别是在细胞应激下，4E-T会调控特定应激反应蛋白的mRNA的翻译。
进一步地，近期研究表明，4E-T具有将miRNA分选进外泌体（一种细胞外囊泡）的作用。由此，细胞能够控制将哪些miRNA装入外泌体。
参考文献：Kouhkan, F., Hafizi, M., Mobarra, N., Mossahebi-Mohammadi, M., Mohammadi, S., Behmanesh, M., … & Sattari, M. (2015). miRNAs: a new method for erythroid differentiation of hematopoietic stem cells without the presence of growth factors. Applied biochemistry and biotechnology, 175(2), 1134-1148.
分子伴侣＊是什么？
分子伴侣（chaperone）是一类蛋白质，其作用是帮助蛋白质形成适当的三维结构（即正确折叠的状态）。如果蛋白质没有正确折叠，其功能可能会受损，或者细胞可能会受到应激。
分子伴侣蛋白不仅帮助新合成的蛋白质正确折叠，还帮助将形状异常的蛋白质正确修复，或帮助降解无法修复的蛋白质。由此，细胞能够维持蛋白质的质量。
此外，分子伴侣还参与蛋白质的运送。也就是说，它们也可以发挥将蛋白质运送到细胞内特定位置的作用。在这种情况下，分子伴侣发挥着为蛋白质”引导”的作用，确保其到达正确的位置。
参考文献：Hartl, F. U., Bracher, A., & Hayer-Hartl, M. (2011). Molecular chaperones in protein folding and proteostasis. Nature, 475(7356), 324-332.